%0 Journal Article %T 小鼠卵丘细胞对牛卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响 %A 任晶晶 %A 赵学明 %A 秦彤 %A 杜卫华 %A 郝海生 %A 刘岩 %A 王栋 %A 朱化彬 %J 农业生物技术学报 %P 356-361 %D 2012 %X ?本实验通过牛生发泡(gv)期无卵丘细胞卵母细胞-裸卵(denudedoocytes,dos)与小鼠卵丘细胞(mousecumuluscells,mccs)共培养,研究异种mccs对牛dos体外成熟和孤雌激活后发育的影响,进而探讨卵丘细胞对卵母细胞的作用机制,为牛卵母细胞体外成熟效率提高提供实验依据。牛卵母细胞分为cocs(cumulus-oocytescomplexes)组、dos+bccs(bovinecumuluscells,bccs)组、dos+mccs组和dos组4个组合,体外成熟22~24h后,检测各组卵母细胞第一极体排出率、mⅱ期卵母细胞中谷胱甘肽(glutathione,gsh)含量和孤雌激活后的发育能力,以及卵母细胞内骨形态发生蛋白15(bmp15)和生长分化因子9(gdf9)mrna相对表达水平。结果表明:(1)dos+mccs组和dos+bccs组卵母细胞核成熟率[(68.48±5.71)%,(71.00±4.27)%]显著低于cocs组(84.70±3.41)%(p<0.05),但均显著高于dos组(54.26±5.03)%(p<0.05);(2)dos+mccs组mⅱ卵母细胞gsh含量和孤雌激活囊胚率[(2.48±0.24)pmol/oocyte,(44.19±4.03)%]与dos+bccs组[(2.49±0.18)pmol/oocyte,(48.57±5.20)%]和dos组[(2.40±0.17)pmol/oocyte,(43.47±7.34)%]之间没有差异,但分别显著低于cocs组[(9.67±0.18)pmol/oocyte,(59.93±6.13)%](p<0.05),各组孤雌激活卵裂率之间没有显著差异[(98.85±4.32)%,(92.11±2.00)%,(95.40±4.11)%,(93.18±3.19)%](p>0.05);(3)dos+mccs组、dos+bccs组和cocs组卵母细胞中bmp15和gdf9mrna相对表达水平均显著性高于dos组(p<0.05),其中,dos+mccs组和cocs组gdf9mrna相对表达水平显著高于dos+bccs组(p<0.05)。实验结果表明,mccs能提高牛dos的核成熟率及bmp15和gdf9mrna相对表达水平,但对牛dos的细胞质成熟和mⅱ卵母细胞孤雌激活胚胎囊胚发育没有促进作用,说明卵丘细胞通过一些旁分泌因子促进卵母细胞核成熟,且这些因子的作用可能没有种属特异性。 %K 牛 %K 小鼠 %K 卵丘细胞 %K 共培养 %K 体外成熟 %K 孤雌发育 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9466.shtml