小反刍兽疫病毒n基因在大肠杆菌中的表达及鉴定

？参照genbank中小反刍兽疫病毒((pestedespetitsruminantsvirus，pprv)n基因序列（nigeria/75/1）(1578bp)设计了1对添加ecorⅰ和notⅰ酶切位点的引物，对从奥地利引进的pci-neo-pprn质粒进行pcr扩增，克隆至pgm-t载体，并转化大肠杆菌escherichia.colitop10感受态细胞，获得重组质粒pgm-t-pprn。将重组质粒经ecorⅰ和notⅰ双酶切的产物插入原核表达载体pet-32a（+），构建原核表达质粒pet-pprn，将其转化进bl21(de3)感受态细胞中后用iptg诱导表达，收集菌液进行sds-page电泳和westernblot分析，结果表明小反刍兽疫病毒n基因在bl21(de3)成功表达。所表达融合蛋白的相对分子质量约为80kd，并能被组氨酸单抗、pprv标准阳性羊血清及pprv疫苗免疫羊血清所识别。