%0 Journal Article %T 小反刍兽疫病毒n基因在大肠杆菌中的表达及鉴定 %A 贾凤芹 %A 李刚** %A 李伟 %A 范晓娟 %A 张坤 %J 农业生物技术学报 %P 183-188 %D 2009 %X ?参照genbank中小反刍兽疫病毒((pestedespetitsruminantsvirus,pprv)n基因序列(nigeria/75/1)(1578bp)设计了1对添加ecorⅰ和notⅰ酶切位点的引物,对从奥地利引进的pci-neo-pprn质粒进行pcr扩增,克隆至pgm-t载体,并转化大肠杆菌escherichia.colitop10感受态细胞,获得重组质粒pgm-t-pprn。将重组质粒经ecorⅰ和notⅰ双酶切的产物插入原核表达载体pet-32a(+),构建原核表达质粒pet-pprn,将其转化进bl21(de3)感受态细胞中后用iptg诱导表达,收集菌液进行sds-page电泳和westernblot分析,结果表明小反刍兽疫病毒n基因在bl21(de3)成功表达。所表达融合蛋白的相对分子质量约为80kd,并能被组氨酸单抗、pprv标准阳性羊血清及pprv疫苗免疫羊血清所识别。 %K 小反刍兽疫病毒 %K n基因 %K 原核表达 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9410.shtml