五指山近交猪胚胎生殖细胞（eg）嵌合体在我国移植产仔

？采集25~28日龄的五指山小型猪（wzsp）胚胎原始生殖嵴细胞（pgcs），用于wzsp生殖细胞（eg）建系培养技术研究。研究发现：以dmem含15%胎牛血清、0.1mol/l巯基乙醇等为基础培养液，分别添加生长因子20ng/mllif、40ng/mlhscf、20ng/mlhbfgf,以sto为饲养层，进行eg培养建系，wzsp3d可出现克隆，其克隆具有出现早，生长数量多，增殖快，成熟亦早，传代率高的特点。培养7~10d需传代或冷冻保存。eg类细胞冷冻、解冻后尚可复苏，并传至11代。若基础培养液不添加生长因子，培养6~10d后亦可出现eg克隆细胞株，但其克隆具有出现晚、数量少、增殖慢等特点。研究中还发现25~26日龄的wzsp胚胎的原始生殖嵴小、不易观察、pgcs分离较困难；27~28日龄的wzsp胚胎的原始生殖嵴体积大、易观察、便于分离并可获得多量的pgcs。同时对pgcs进行了形态学、体外分化、akp染色鉴定等研究。2002年9-12月，在中国农业科学院畜牧研究所五指山猪保种场先后从22头超排处理的大白猪供体中，于配种后（当天为0d）5.5~7d实施手术法获得252枚可用胚。将123枚胚胎显微注射wzsp的eg细胞，每枚注射5~15个细胞，与未注射的103枚混合分别移植给9头受体，平均每头受体移植胚胎25.11±5.11枚、含注射eg细胞胚胎13.67±3.57枚，其中7头分别于移植15~22d返情，1头妊娠，1头待观察。其中2002年9月17日移植30枚胚胎的133号受体，于2003年元月8日产仔8头，其中6头为白色毛仔猪，2头表现为皮肤色素嵌合。