%0 Journal Article %T 五指山近交猪胚胎生殖细胞(eg)嵌合体在我国移植产仔 %A 冯书堂 %A 丛笑倩 %A 刘立新 %A 李秀兰 %A 董晓 %A 包林平 %A 张莉 %A 陈红平 %A 牟玉莲 %A 况玲 %A 张青峰 %A 姚金王王 %J 牲畜兽医学报 %P 311-312 %D 2005 %X ?采集25~28日龄的五指山小型猪(wzsp)胚胎原始生殖嵴细胞(pgcs),用于wzsp生殖细胞(eg)建系培养技术研究。研究发现:以dmem含15%胎牛血清、0.1mol/l巯基乙醇等为基础培养液,分别添加生长因子20ng/mllif、40ng/mlhscf、20ng/mlhbfgf,以sto为饲养层,进行eg培养建系,wzsp3d可出现克隆,其克隆具有出现早,生长数量多,增殖快,成熟亦早,传代率高的特点。培养7~10d需传代或冷冻保存。eg类细胞冷冻、解冻后尚可复苏,并传至11代。若基础培养液不添加生长因子,培养6~10d后亦可出现eg克隆细胞株,但其克隆具有出现晚、数量少、增殖慢等特点。研究中还发现25~26日龄的wzsp胚胎的原始生殖嵴小、不易观察、pgcs分离较困难;27~28日龄的wzsp胚胎的原始生殖嵴体积大、易观察、便于分离并可获得多量的pgcs。同时对pgcs进行了形态学、体外分化、akp染色鉴定等研究。2002年9-12月,在中国农业科学院畜牧研究所五指山猪保种场先后从22头超排处理的大白猪供体中,于配种后(当天为0d)5.5~7d实施手术法获得252枚可用胚。将123枚胚胎显微注射wzsp的eg细胞,每枚注射5~15个细胞,与未注射的103枚混合分别移植给9头受体,平均每头受体移植胚胎25.11±5.11枚、含注射eg细胞胚胎13.67±3.57枚,其中7头分别于移植15~22d返情,1头妊娠,1头待观察。其中2002年9月17日移植30枚胚胎的133号受体,于2003年元月8日产仔8头,其中6头为白色毛仔猪,2头表现为皮肤色素嵌合。 %K 嵌合体 %K 囊胚 %K 近交系猪 %K 原始生殖嵴细胞 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract8451.shtml