鸡胚精原细胞体外转染egfp方法的比较

？以增强型绿色荧光蛋白（enhancedgreenfluorescentprotein，egfp）为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞（chickenembryonicspermatogonialcells，cescs），比较磷酸钙、脂质体(梭华-sofast)、电穿孔3种方法转染egfp的效率，以获得高效的体外转染方法。本研究分离孵化16d的鸡胚睾丸，获取cescs，体外培养和传代扩增，传至第2代后进行碱性磷酸酶（akp）活性和阶段特异性表面抗原-1（stagespecificembryonicantigen-1，ssea-1）免疫荧光鉴定。运用磷酸钙、脂质体(梭华-sofast)、电穿孔3种方法体外转染第2代cescs，荧光细胞计数法分析转染效率。结果表明：与磷酸钙法、脂质体法相比，电穿孔法可获得更高的细胞成活率和转染率(68％vs39％、65％，19.70％vs2.92％、9.73％），差异显著（p<0.05）。因此得出，电穿孔法是将外源基因导入鸡胚精原细胞的适宜方法。