%0 Journal Article %T 鸡胚精原细胞体外转染egfp方法的比较 %A 余飞 %A 孙国波 %A 孙鹏翔 %A 何先红 %A 倪黎纲 %A 李碧春 %J 牲畜兽医学报 %P 164-169 %D 2008 %X ?以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,egfp)为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞(chickenembryonicspermatogonialcells,cescs),比较磷酸钙、脂质体(梭华-sofast)、电穿孔3种方法转染egfp的效率,以获得高效的体外转染方法。本研究分离孵化16d的鸡胚睾丸,获取cescs,体外培养和传代扩增,传至第2代后进行碱性磷酸酶(akp)活性和阶段特异性表面抗原-1(stagespecificembryonicantigen-1,ssea-1)免疫荧光鉴定。运用磷酸钙、脂质体(梭华-sofast)、电穿孔3种方法体外转染第2代cescs,荧光细胞计数法分析转染效率。结果表明:与磷酸钙法、脂质体法相比,电穿孔法可获得更高的细胞成活率和转染率(68%vs39%、65%,19.70%vs2.92%、9.73%),差异显著(p<0.05)。因此得出,电穿孔法是将外源基因导入鸡胚精原细胞的适宜方法。 %K 鸡 %K 精原细胞 %K 增强型绿色荧光蛋白 %K 体外转染 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract9308.shtml