检测施马伦贝格病毒核酸的荧光定量rt-pcr方法

？根据施马伦贝格病毒（schmallenbergvirus，sbv）s基因节段设计一对引物和taqman探针，建立了检测sbv核酸的荧光定量rt-pcr方法。通过优化反应体系和反应条件，该方法对101～107半数组织培养感染量（tcid50）的sbv核酸呈现良好的线性关系。利用德国fli制备和保存的sbv核酸阳性（n=140）、sbv核酸阴性（n=132）和辛波血清群相关病毒核酸样品（n=16），对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证。结果表明，所建立方法与fli研制的sbv荧光定量rt-pcr具有相近的敏感性，两者对140份sbv核酸阳性样品的检测符合率达96.4%（135/140）；可灵敏地检测出1tcid50的sbvrna，并具有良好的重复性；除道格拉斯病毒（douglasvirus）外，与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应。用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清（n=47）和澳大利亚进口绵羊血清（n=47）的rna进行了检测，结果未发现sbv核酸阳性样品。sbv荧光定量rt-pcr检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段。