%0 Journal Article %T 检测施马伦贝格病毒核酸的荧光定量rt-pcr方法 %A 张永宁 %A 吴绍强 %A 吕继洲 %A 冯春燕 %A 王彩霞 %A 邓俊花 %A 袁向芬 %A 林祥梅 %J 牲畜兽医学报 %P 1824-1829 %D 2014 %X ?根据施马伦贝格病毒(schmallenbergvirus,sbv)s基因节段设计一对引物和taqman探针,建立了检测sbv核酸的荧光定量rt-pcr方法。通过优化反应体系和反应条件,该方法对101~107半数组织培养感染量(tcid50)的sbv核酸呈现良好的线性关系。利用德国fli制备和保存的sbv核酸阳性(n=140)、sbv核酸阴性(n=132)和辛波血清群相关病毒核酸样品(n=16),对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证。结果表明,所建立方法与fli研制的sbv荧光定量rt-pcr具有相近的敏感性,两者对140份sbv核酸阳性样品的检测符合率达96.4%(135/140);可灵敏地检测出1tcid50的sbvrna,并具有良好的重复性;除道格拉斯病毒(douglasvirus)外,与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应。用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清(n=47)和澳大利亚进口绵羊血清(n=47)的rna进行了检测,结果未发现sbv核酸阳性样品。sbv荧光定量rt-pcr检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段。 %K 施马伦贝格病毒 %K 核酸 %K 引物 %K taqman探针 %K 荧光定量rt-pcr %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13413.shtml