共表达猪ifn-γ基因对ppvvp2-pcvorf2真核质粒的分子免疫佐剂效应研究

？将干扰素-γ、猪圆环病毒ⅱ型orf2主要抗原表位（47—85位aa）和猪细小病毒vp2基因克隆至pci-neo真核载体中，构建重组质粒pci-ifn-γ.orf2.vp2。用脂质体介导法将其转染到mdbk细胞中，利用rtpcr和间接免疫荧光法检测产物的表达情况。将重组质粒pci-ifn-γ.orf2.vp2、pci-orf2.vp2、对照质粒pci-neo、pbs、猪细小病毒灭活苗和猪圆环病毒亚单位疫苗通过肌肉注射免疫小鼠，检测小鼠不同时期的淋巴细胞转化功能、t淋巴细胞亚群动态变化情况以及ppv、pcv2抗体水平。试验结果显示，在转染重组质粒的mdbk细胞中能扩增到orf2-vp2和ifn-γ基因；转染后48h用间接免疫荧光法能在荧光显微镜下观察到绿色荧光，检测到特异性蛋白的表达。pci-ifn-γ.orf2.vp2免疫组从第7天开始脾淋巴细胞对cona有明显反应，显著高于对照组和pci-orf2.vp2免疫组；cd3+cd4+、cd3+cd8+t淋巴细胞的数量高于或显著高于对照组和pci-orf2.vp2免疫组；在免疫后第14天检测到ppvpcv抗体。结果表明，pci-ifn-γ.orf2.vp2能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。