%0 Journal Article %T 共表达猪ifn-γ基因对ppvvp2-pcvorf2真核质粒的分子免疫佐剂效应研究 %A 陈燕凌 %A 徐志文 %A 郭万柱 %A 朱玲 %A 徐凯 %A 唐玉香 %J 牲畜兽医学报 %P 1274-1280 %D 2010 %X ?将干扰素-γ、猪圆环病毒ⅱ型orf2主要抗原表位(47—85位aa)和猪细小病毒vp2基因克隆至pci-neo真核载体中,构建重组质粒pci-ifn-γ.orf2.vp2。用脂质体介导法将其转染到mdbk细胞中,利用rtpcr和间接免疫荧光法检测产物的表达情况。将重组质粒pci-ifn-γ.orf2.vp2、pci-orf2.vp2、对照质粒pci-neo、pbs、猪细小病毒灭活苗和猪圆环病毒亚单位疫苗通过肌肉注射免疫小鼠,检测小鼠不同时期的淋巴细胞转化功能、t淋巴细胞亚群动态变化情况以及ppv、pcv2抗体水平。试验结果显示,在转染重组质粒的mdbk细胞中能扩增到orf2-vp2和ifn-γ基因;转染后48h用间接免疫荧光法能在荧光显微镜下观察到绿色荧光,检测到特异性蛋白的表达。pci-ifn-γ.orf2.vp2免疫组从第7天开始脾淋巴细胞对cona有明显反应,显著高于对照组和pci-orf2.vp2免疫组;cd3+cd4+、cd3+cd8+t淋巴细胞的数量高于或显著高于对照组和pci-orf2.vp2免疫组;在免疫后第14天检测到ppvpcv抗体。结果表明,pci-ifn-γ.orf2.vp2能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。 %K 猪细小病毒 %K vp2基因 %K 猪圆环病毒 %K orf2基因 %K ifn-γ基因 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract11852.shtml