猪链球菌2型分泌核酸酶（ssna）的表达、elisa方法建立及其在鉴别诊断中的应用

？猪链球菌2型（streptococcussuistype2，ss2）是一种广泛分布的人畜共患病原菌，严重危害着人类健康和养猪业的发展。本试验旨在研究分泌核酸酶基因（ssna）作为分子诊断标识在对ss2感染的鉴别诊断中所起的作用。作者以ss2-lt菌株基因组dna为模板，通过pcr扩增ssna基因片段，将该片段克隆到表达载体pet-28a(+)中，在大肠杆菌bl21(de3)中成功表达，获得大小为46ku的融合蛋白，经sds-page和westernblot分析表明，重组蛋白质具有抗原反应活性。以纯化的融合蛋白作为包被抗原，建立了ssna-elisa鉴别诊断方法。对已知背景的人工感染及疫苗免疫血清和临床血清进行检测，比较感染血清和免疫血清的检测结果，结果发现两者差异显著（p<0.05），表明建立的ssna-elisa方法具有良好的检测效果。利用该方法对采集自8个省份的1446份血清进行检测，显示ss2的阳性率为0%～14.77%，平均阳性率为5.39%。本研究结果表明：猪链球菌2型ssna可以作为一个良好的鉴别感染的分子诊断标识；对临床血清的检测结果表明感染及流行与气候环境存在明显的关系。