%0 Journal Article %T 猪链球菌2型分泌核酸酶(ssna)的表达、elisa方法建立及其在鉴别诊断中的应用 %A 朱剑 %A 康超 %A 张安定 %A 金梅林 %J 牲畜兽医学报 %P 228-235 %D 2011 %X ?猪链球菌2型(streptococcussuistype2,ss2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展。本试验旨在研究分泌核酸酶基因(ssna)作为分子诊断标识在对ss2感染的鉴别诊断中所起的作用。作者以ss2-lt菌株基因组dna为模板,通过pcr扩增ssna基因片段,将该片段克隆到表达载体pet-28a(+)中,在大肠杆菌bl21(de3)中成功表达,获得大小为46ku的融合蛋白,经sds-page和westernblot分析表明,重组蛋白质具有抗原反应活性。以纯化的融合蛋白作为包被抗原,建立了ssna-elisa鉴别诊断方法。对已知背景的人工感染及疫苗免疫血清和临床血清进行检测,比较感染血清和免疫血清的检测结果,结果发现两者差异显著(p<0.05),表明建立的ssna-elisa方法具有良好的检测效果。利用该方法对采集自8个省份的1446份血清进行检测,显示ss2的阳性率为0%~14.77%,平均阳性率为5.39%。本研究结果表明:猪链球菌2型ssna可以作为一个良好的鉴别感染的分子诊断标识;对临床血清的检测结果表明感染及流行与气候环境存在明显的关系。 %K 猪链球菌2型 %K 分泌核酸酶(ssna) %K 鉴别诊断 %K elisa %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract10837.shtml