猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

？本研究通过rt-pcr方法从用cona刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪il-15（pil-15）编码序列的cdna，将其克隆至t载体pmd18-t后，序列测定表明pil-15基因长度为489bp，编码162个氨基酸。进一步通过pcr方法获得缺失其n端48aa的信号肽序列的成熟pil-15蛋白基因，将其亚克隆到原核表达载体pet-28a的6×his下游，构建重组表达质粒pet-pil15，转化大肠杆菌bl21（de3），iptg诱导，重组菌体裂解物经sds-page可检测到分子量约为15ku的重组蛋白，其表达量占总菌体蛋白量的17.5%。westernblot试验也证实表达的重组融合蛋白6×his-pil15能够很好地与抗6×his单抗发生反应。猪il-15基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。