%0 Journal Article %T 猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 %A 江云波 %A 方六荣 %A 肖少波 %A 张辉 %A 潘永飞 %A 罗锐 %A 李彬 %A 陈焕春 %J 牲畜兽医学报 %P 841-845 %D 2007 %X ?本研究通过rt-pcr方法从用cona刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪il-15(pil-15)编码序列的cdna,将其克隆至t载体pmd18-t后,序列测定表明pil-15基因长度为489bp,编码162个氨基酸。进一步通过pcr方法获得缺失其n端48aa的信号肽序列的成熟pil-15蛋白基因,将其亚克隆到原核表达载体pet-28a的6×his下游,构建重组表达质粒pet-pil15,转化大肠杆菌bl21(de3),iptg诱导,重组菌体裂解物经sds-page可检测到分子量约为15ku的重组蛋白,其表达量占总菌体蛋白量的17.5%。westernblot试验也证实表达的重组融合蛋白6×his-pil15能够很好地与抗6×his单抗发生反应。猪il-15基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。 %K 猪白细胞介素15 %K 基因克隆 %K 原核表达 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract11828.shtml