猪sar1b基因的分子克隆、序列分析及原核表达

？根据genbank已发表的猪sar1b基因序列(genbank登录号：ay819557)设计1对引物，以猪肝脏组织总rna的反转录产物为扩增模板，用rt-pcr方法扩增出猪sar1b基因cdna全长编码区，经过ecori-sali双酶切后定向克隆于pet28a原核表达载体，获得pet28a-sar1b重组原核表达载体。将携带有重组原核表达载体的大肠杆菌bl21(de3)通过1mmol/litpg进行诱导表达，经过sds-page电泳检测，显示诱导表达蛋白大小大约为26ku，与预期表达蛋白大小一致。westernblot检测显示该蛋白为his融合蛋白，表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。猪sar1b基因的克隆和表达研究，为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。