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牲畜兽医学报 2009
猪支气管败血波氏杆菌菌毛fimd基因的克隆表达及间接elisa检测方法的建立, PP. 98-102 Keywords: 支气管败血波氏杆菌,fimd,克隆,表达,elisa Abstract: ?参照genbank上支气管败血波氏杆菌的菌毛fimd基因序列(x75811),设计1对引物,从本实验室分离鉴定的猪源支气管败血波氏杆菌中扩增出fimd编码区1098bp的片段,将其克隆至原核表达载体pet-28a,转化到大肠杆菌bl21(de3)中进行融合表达。sds-page和westernblot检测证实该表达产物以包涵体形式存在,大小约42ku,与用支气管败血波氏杆菌菌体制备的阳性血清能发生特异性反应。将包涵体变性和复性后包被酶标板建立间接elisa(fimd-elisa),特异性良好。用fimd-elisa检测临床送检的668份血清,阳性率为30.7%。用该法与微量凝集试验平行检测102份血清,fimd-elisa的敏感性高于微量凝集试验。
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