%0 Journal Article %T 猪支气管败血波氏杆菌菌毛fimd基因的克隆表达及间接elisa检测方法的建立 %A 何华 %A 裴洁 %A 吴斌 %A 赵战勤 %A 张建民 %A 罗勇 %A 向敏 %A 卢顺 %J 牲畜兽医学报 %P 98-102 %D 2009 %X ?参照genbank上支气管败血波氏杆菌的菌毛fimd基因序列(x75811),设计1对引物,从本实验室分离鉴定的猪源支气管败血波氏杆菌中扩增出fimd编码区1098bp的片段,将其克隆至原核表达载体pet-28a,转化到大肠杆菌bl21(de3)中进行融合表达。sds-page和westernblot检测证实该表达产物以包涵体形式存在,大小约42ku,与用支气管败血波氏杆菌菌体制备的阳性血清能发生特异性反应。将包涵体变性和复性后包被酶标板建立间接elisa(fimd-elisa),特异性良好。用fimd-elisa检测临床送检的668份血清,阳性率为30.7%。用该法与微量凝集试验平行检测102份血清,fimd-elisa的敏感性高于微量凝集试验。 %K 支气管败血波氏杆菌 %K fimd %K 克隆 %K 表达 %K elisa %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract10730.shtml