单核细胞增生李斯特菌非编码rnarli87基因缺失株的构建、鉴定及其生长特性初步研究

？拟构建单核细胞增生李斯特菌（lm）非编码rna？ril87基因缺失株，对其进行分子鉴定，分析rli87基因缺失对lm生长的影响。用融合pcr方法构建lm-sb5rli87基因缺失突变体，并构建pksv7-δrli87穿梭载体，将其转化入lm-sb5感受态细胞，利用温度（42℃）和氯霉素（10μg？ml-1）的抗性双重压力来实现同源重组，筛选同源重组菌进行分子鉴定，测定缺失株与母源野毒株37℃条件下生长曲线。结果显示：pcr和测序结果证实成功获得了lm-δrli87重组菌。通过25代的连续传代，pcr鉴定结果显示，该缺失株具有良好的遗传稳定性。与野毒株进行对比，在37℃条件下缺失株与野毒株的生长差异不显著（p>0.05）。非编码rnarli87基因在37℃条件下对lm生长没有明显的调控作用。