%0 Journal Article %T 单核细胞增生李斯特菌非编码rnarli87基因缺失株的构建、鉴定及其生长特性初步研究 %A 谢堃 %A 乔军 %A 孟庆玲 %A 彭叶龙 %A 赵海龙 %A 马玉 %A 陈诚 %A 才学鹏 %A 陈创夫 %J 牲畜兽医学报 %P 998-1003 %D 2015 %X ?拟构建单核细胞增生李斯特菌(lm)非编码rna?ril87基因缺失株,对其进行分子鉴定,分析rli87基因缺失对lm生长的影响。用融合pcr方法构建lm-sb5rli87基因缺失突变体,并构建pksv7-δrli87穿梭载体,将其转化入lm-sb5感受态细胞,利用温度(42℃)和氯霉素(10μg?ml-1)的抗性双重压力来实现同源重组,筛选同源重组菌进行分子鉴定,测定缺失株与母源野毒株37℃条件下生长曲线。结果显示:pcr和测序结果证实成功获得了lm-δrli87重组菌。通过25代的连续传代,pcr鉴定结果显示,该缺失株具有良好的遗传稳定性。与野毒株进行对比,在37℃条件下缺失株与野毒株的生长差异不显著(p>0.05)。非编码rnarli87基因在37℃条件下对lm生长没有明显的调控作用。 %K rli87基因 %K lm感受态细胞 %K 缺失株 %K 生长特性 %K 同源重组 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13607.shtml