rnai对小鼠胚胎成纤维细胞中mc1r基因表达的影响

？旨在研究rnai对小鼠胚胎成纤维细胞（mef）黑素皮质素受体1（melanocortin-receptor，mc1r）基因表达的影响；以mc1r基因作为影响哺乳动物毛色性状的候选基因，通过rna干扰（rnai）技术抑制小鼠胚胎成纤维细胞中mc1r基因表达。合成3对针对小鼠mef中mc1r基因的瞬时干扰sirna，采用反向转染法将sirna转染入mef，取转染sirna48h后的小鼠胚胎成纤维细胞提取总rna和总蛋白，并通过qrt-pcr技术和westernbolt检测mc1rmrna和其蛋白的相对表达量；结果显示，sirna1组和sirna2组的mc1rmrna相对表达量和mc1r蛋白表达量显著低于空白对照组（p<0.05），但sirna3组表达不显著；本试验利用反向转染方法，成功地对体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞进行sirna转染。mc1r基因与蛋白的抑制情况相一致，说明sirna1和sirna2对mc1r的抑制效果确实有效，并筛选出有显著干扰效果的sirna，为进一步研究mc1r在毛色发育过程中的调控机理提供科学依据。