%0 Journal Article %T rnai对小鼠胚胎成纤维细胞中mc1r基因表达的影响 %A 尹志红 %A 王恩峰 %A 白瑞 %A 庞全海 %J 牲畜兽医学报 %P 218-224 %D 2014 %X ?旨在研究rnai对小鼠胚胎成纤维细胞(mef)黑素皮质素受体1(melanocortin-receptor,mc1r)基因表达的影响;以mc1r基因作为影响哺乳动物毛色性状的候选基因,通过rna干扰(rnai)技术抑制小鼠胚胎成纤维细胞中mc1r基因表达。合成3对针对小鼠mef中mc1r基因的瞬时干扰sirna,采用反向转染法将sirna转染入mef,取转染sirna48h后的小鼠胚胎成纤维细胞提取总rna和总蛋白,并通过qrt-pcr技术和westernbolt检测mc1rmrna和其蛋白的相对表达量;结果显示,sirna1组和sirna2组的mc1rmrna相对表达量和mc1r蛋白表达量显著低于空白对照组(p<0.05),但sirna3组表达不显著;本试验利用反向转染方法,成功地对体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞进行sirna转染。mc1r基因与蛋白的抑制情况相一致,说明sirna1和sirna2对mc1r的抑制效果确实有效,并筛选出有显著干扰效果的sirna,为进一步研究mc1r在毛色发育过程中的调控机理提供科学依据。 %K ?小干扰rna %K 黑素皮质素受体1基因 %K 小鼠胚胎成纤维细胞 %K 抑制率 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13166.shtml