聚凝胺增强Ror2重组腺病毒感染K562细胞效应的研究

[摘要]　目的　探索应用聚凝胺(polybrene)试剂增强Ror2重组腺病毒对K562细胞转染效率的技术。方法　在K562细胞中分别加入0~12μlRor2重组腺病毒，摸索最佳重组腺病毒用量；同时加入0~5μg/mlpolybrene和最佳重组腺病毒用量，培养1~3d后，在荧光显微镜下计数，对比加入polybrene前后被感染的细胞数。台盼蓝染色观察重组腺病毒引起K562细胞死亡的情况。采用RT-PCR和Westernblotting检测Ror2基因的表达情况。结果　Polybrene浓度为3μg/ml和重组腺病毒8μl时，感染效果最佳，对细胞生长影响较小，实验组感染效果是对照组的17倍；加入polybrene后，外源性Ror2mRNA和蛋白表达水平均明显增高。结论　Polybrene能显著增强重组腺病毒感染K562细胞的作用，并能高效表达外源性Ror2基因，该法简便、价廉、有效，是血液疾病分子生物学研究的一个良好策略。