%0 Journal Article %T 聚凝胺增强Ror2重组腺病毒感染K562细胞效应的研究 %A 高爱君 %A 司维柯 %A 赵宸 %A 吴韦铷 %J 解放军医学杂志 %P 976-980 %D 2015 %X [摘要] 目的 探索应用聚凝胺(polybrene)试剂增强Ror2重组腺病毒对K562细胞转染效率的技术。方法 在K562细胞中分别加入0~12μlRor2重组腺病毒,摸索最佳重组腺病毒用量;同时加入0~5μg/mlpolybrene和最佳重组腺病毒用量,培养1~3d后,在荧光显微镜下计数,对比加入polybrene前后被感染的细胞数。台盼蓝染色观察重组腺病毒引起K562细胞死亡的情况。采用RT-PCR和Westernblotting检测Ror2基因的表达情况。结果 Polybrene浓度为3μg/ml和重组腺病毒8μl时,感染效果最佳,对细胞生长影响较小,实验组感染效果是对照组的17倍;加入polybrene后,外源性Ror2mRNA和蛋白表达水平均明显增高。结论 Polybrene能显著增强重组腺病毒感染K562细胞的作用,并能高效表达外源性Ror2基因,该法简便、价廉、有效,是血液疾病分子生物学研究的一个良好策略。 %K 聚凝胺 %K 腺病毒科 %K K562细胞 %K 基因 %K ror2 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=81458