乙型肝炎病毒聚合酶片段的表达及其在血清学检测中的应用

目的？建立乙型肝炎患者血清HBV病毒聚合酶抗体（抗-HBp）的ELISA检测方法。方法？？构建HBV反转录酶/DNA？聚合酶（HBV-Pol）基因原核表达载体pQE30-Pol，表达并纯化目的蛋白，用间接ELISA法检测274例乙型肝炎患者及50例正常人血？清中的抗-HBp抗体，并与HBV-DNA实时荧光定量检测结果比较。结果？？成功将HBV-Pol基因插入原核表达载体pQE30，并在大？肠埃希菌M15中获得了高效表达，表达产物以包涵体形式存在。以纯化的重组蛋白建立间接ELISA检测方法，在检测的274例乙型？肝炎患者中，HBsAg？？？+？？/HBeAg？？？+？？/抗HBc？？？+？？，HBsAg？？？+？？/抗HBe？？？+？？/抗HBc？？？+？？，HBsAg？？？+？？/抗HBc？？？+？？患者血清中的抗-HBp抗体阳性率分别为？97.8%、57.9%和13.2%，平均阳性率58.8%，而正常人血清抗-HBp均为阴性。运用此法测得的血清抗-HBp阳性率和实时定量PCR？检测结果无统计学差异（P=0.359）。结论？？成功表达了HBV-Pol片段并且建立了血清抗-HBp抗体的检测方法，为进一步研究乙型？肝炎患者血清HBV-Pol抗体的血清学意义奠定了基础。