%0 Journal Article %T 乙型肝炎病毒聚合酶片段的表达及其在血清学检测中的应用 %A 范公忍 %A 陈士华 %A 安小平 %A 张宝中 %A 张昕 %A 周育森 %A 姚鹏 %A 童贻刚 %J 解放军医学杂志 %P 163-165 %D 2010 %X 目的?建立乙型肝炎患者血清HBV病毒聚合酶抗体(抗-HBp)的ELISA检测方法。方法??构建HBV反转录酶/DNA?聚合酶(HBV-Pol)基因原核表达载体pQE30-Pol,表达并纯化目的蛋白,用间接ELISA法检测274例乙型肝炎患者及50例正常人血?清中的抗-HBp抗体,并与HBV-DNA实时荧光定量检测结果比较。结果??成功将HBV-Pol基因插入原核表达载体pQE30,并在大?肠埃希菌M15中获得了高效表达,表达产物以包涵体形式存在。以纯化的重组蛋白建立间接ELISA检测方法,在检测的274例乙型?肝炎患者中,HBsAg???+??/HBeAg???+??/抗HBc???+??,HBsAg???+??/抗HBe???+??/抗HBc???+??,HBsAg???+??/抗HBc???+??患者血清中的抗-HBp抗体阳性率分别为?97.8%、57.9%和13.2%,平均阳性率58.8%,而正常人血清抗-HBp均为阴性。运用此法测得的血清抗-HBp阳性率和实时定量PCR?检测结果无统计学差异(P=0.359)。结论??成功表达了HBV-Pol片段并且建立了血清抗-HBp抗体的检测方法,为进一步研究乙型?肝炎患者血清HBV-Pol抗体的血清学意义奠定了基础。 %K 肝炎 %K 乙型 %K 慢性 %K 血清学试验 %K 基因 %K pol %K 酶联免疫吸附测定 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=14016