Neuritin毕赤酵母表达系统的构建及其对PC12细胞的影响

旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白，研究其神经生物学功能。PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列，并纯化回收，通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中，转化大肠杆菌DH5α，neuritin-pPIC9k重组质粒经PCR与测序鉴定后，使用SalⅠ酶切使其线性化，电击转化酵母菌GS115，经筛选与鉴定，成功构建了Neuritin的毕赤酵母表达系统。结果表明，使用甲醇诱导其表达，SDS-PAGE和Westernblot分析得到11kD的Neuritin蛋白，纯化的Neuritin蛋白加入PC12细胞培养液中，能促进其突起的生长。