%0 Journal Article %T Neuritin毕赤酵母表达系统的构建及其对PC12细胞的影响 %A 张树军 %A 赵臣 %A 狄建军 %A 穆莎茉莉 %A 仙玲玲 %A 于娜 %A 黄瑾 %J 生物技术通报 %P 148-152 %D 2013 %X 旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白,研究其神经生物学功能。PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列,并纯化回收,通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中,转化大肠杆菌DH5α,neuritin-pPIC9k重组质粒经PCR与测序鉴定后,使用SalⅠ酶切使其线性化,电击转化酵母菌GS115,经筛选与鉴定,成功构建了Neuritin的毕赤酵母表达系统。结果表明,使用甲醇诱导其表达,SDS-PAGE和Westernblot分析得到11kD的Neuritin蛋白,纯化的Neuritin蛋白加入PC12细胞培养液中,能促进其突起的生长。 %K NeuritinpPIC9k %K 毕赤酵母表达系统 %K PC12细胞 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10021.shtml