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ISSN: 2333-9721
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亮氨酸水平对奶牛乳腺上皮细胞增殖及κ-酪蛋白合成相关基因表达的影响

DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2015.05.028

Keywords: 亮氨酸,细胞增殖,κ-酪蛋白,基因表达

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Abstract:

本试验旨在研究添加不同水平亮氨酸对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白(CSN3)合成相关基因表达的影响。选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以不含有亮氨酸的培养基为对照组(0×组),试验组培养基分别添加0.1125(0.25×组)、0.2250(0.5×组)、0.4500(1×组)、0.9000(2×组)、1.8000(4×组)、3.6000(8×组)、7.2000(16×组)、14.4000mmol/L(32×组)的亮氨酸。试验采用噻唑蓝(MTT)比色法检测奶牛乳腺上皮细胞增殖;运用实时定量PCR检测CSN3合成相关基因相对表达量。结果表明:亮氨酸能够提高乳腺上皮细胞的相对增殖率。24和48h时,除0.25×组外,其余各组与对照组相比细胞均差异均显著(P<0.05);72h时,各组与对照组相比差异均显著(P<0.05);其中2×组的促增殖作用都达到最强。亮氨酸能够促进哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)、蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)、转录激活因子5(STAT5)和CSN3基因的表达,抑制真核细胞翻译启动因子4E结合蛋白1(4EBP1)基因的表达,其中2×组对mTOR、S6K1、JAK2、STAT5和CSN3基因的上调表达最强,而对4EBP1基因的下调表达最强。总之,添加亮氨酸能够促进奶牛乳腺上皮细胞增殖和CSN3合成相关基因(除4EBP1)表达,亮氨酸水平为0.9000mmol/L时,其促进作用均达到最大。

References

[1]  王志钢,吴应积,旭日干.mTOR信号通路与细胞生长调控[J].生物物理学报,2007,23(5):333-342.
[2]  庞学燕.亮氨酸在奶牛乳腺中的摄取效率及其对乳蛋白合成的影响[D].硕士学位论文.扬州:扬州大学,2013:1-62.
[3]  徐柏林.精氨酸对乳腺上皮细胞中酪蛋白合成的影响及其调控机制[D].硕士学位论文.扬州:扬州大学,2012:2-55.
[4]  夏文水,SINDAYIKENGERA S.食品中乳蛋白的重要作用[J].食品与生物技术学报,2005,24(6):100-105.
[5]  刘红云,刘建新,王迪铭.功能性氨基酸在反刍动物营养中的研究进展[C]//饲料营养研究进展.北京:中国畜牧兽医学会,2010:181-189.
[6]  李喜艳.奶牛乳腺上皮细胞中赖氨酸蛋氨酸配比模式对酪蛋白合成的影响及机理研究[D].硕士学位论文.北京:中国农业科学院,2011:1-32.
[7]  DARDEVET D,SORNET C,BAYLE G,et al.Postprandial stimulation of muscle protein synthesis in old rats can be restored by a leucine-supplemented meal[J].The Journal of Nutrition,2002,132(1):95-100.
[8]  NORTON L E,LAYMAN D K.Leucine regulates translation initiation of protein synthesis in skeletal muscle after exercise[J].The Journal of Nutrition,2006,136(2):533S-537S.
[9]  KIMBALL S R,JEFFERSON L S.Signaling pathways and molecular mechanisms through which branched-chain amino acids mediate translational control of protein synthesis[J].The Journal of Nutrition,2006,136(1):227S-231S.
[10]  胡菡,王加启,李发弟,等.高温诱导体外培养奶牛乳腺上皮细胞的应激响应[J].农业生物技术学报,2011,19(2):287-293.
[11]  SIGL T,MEYER H H D,WIEDEMANN S.Gene expression analysis of protein synthesis pathways in bovine mammary epithelial cells purified from milk during lactation and short-term restricted feeding[J].Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition,2013,98(1):84-95.
[12]  周振峰,崔瑞莲,王加启,等.热应激对体外培养奶牛乳腺上皮细胞生长、凋亡及其热休克蛋白mRNA转录的影响[J].畜牧兽医学报,2010,41(5):600-607.
[13]  庞学燕,季昀,田青,等.亮氨酸对κ-酪蛋白合成的影响及相关信号通路的研究[J].中国畜牧杂志,2013(9):38-41.
[14]  MERCIER J C,GAYE P.Early events in secretion of main milk proteins:occurrence of precursors[J].Journal of Dairy Science,1982,65(2):299-316.
[15]  LEVY D E,DARNELL J E Jr.STATs:transcriptional control and biological impact[J].Nature,2002,3(9):651-662.
[16]  LYNCH C J.Role of leucine in the regulation of mTOR by amino acids:revelations from structure-activity studies[J].The Journal of Nutrition,2001,131(3):861S-865S.

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