%0 Journal Article %T 亮氨酸水平对奶牛乳腺上皮细胞增殖及κ-酪蛋白合成相关基因表达的影响 %J 动物营养学报 %D 2015 %R 10.3969/j.issn.1006-267x.2015.05.028 %X 本试验旨在研究添加不同水平亮氨酸对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白(CSN3)合成相关基因表达的影响。选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以不含有亮氨酸的培养基为对照组(0×组),试验组培养基分别添加0.1125(0.25×组)、0.2250(0.5×组)、0.4500(1×组)、0.9000(2×组)、1.8000(4×组)、3.6000(8×组)、7.2000(16×组)、14.4000mmol/L(32×组)的亮氨酸。试验采用噻唑蓝(MTT)比色法检测奶牛乳腺上皮细胞增殖;运用实时定量PCR检测CSN3合成相关基因相对表达量。结果表明:亮氨酸能够提高乳腺上皮细胞的相对增殖率。24和48h时,除0.25×组外,其余各组与对照组相比细胞均差异均显著(P<0.05);72h时,各组与对照组相比差异均显著(P<0.05);其中2×组的促增殖作用都达到最强。亮氨酸能够促进哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)、蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)、转录激活因子5(STAT5)和CSN3基因的表达,抑制真核细胞翻译启动因子4E结合蛋白1(4EBP1)基因的表达,其中2×组对mTOR、S6K1、JAK2、STAT5和CSN3基因的上调表达最强,而对4EBP1基因的下调表达最强。总之,添加亮氨酸能够促进奶牛乳腺上皮细胞增殖和CSN3合成相关基因(除4EBP1)表达,亮氨酸水平为0.9000mmol/L时,其促进作用均达到最大。 %K 亮氨酸 %K 细胞增殖 %K κ-酪蛋白 %K 基因表达 %U http://www.chinajan.com/CN/abstract/abstract11926.shtml