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ISSN: 2333-9721
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RT-PCR检测甜菜坏死黄脉病毒及总RNA提取方法研究

DOI: 10.7668/hbnxb.2008.01.046, PP. 207-210

Keywords: 甜菜,甜菜坏死黄脉病毒,RT-PCR

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Abstract:

为选择较为适合甜菜总RNA的提取方法,构建和优化RT有效体系。以田间甜菜叶片、根毛及根表皮为材料,研究了提取甜菜总RNA的方法以及利用RT-PCR技术进行甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)的检测。研究表明,获得良好的RT-PCR扩增效果,RT体系中dNTPs浓度、引物、AMV、模板RNA的浓度要分别达到1mmol/L,1μmol/L,0.1U/μL,0.01μg/μL较好。PCR体系中dNTPs浓度、引物、TaqDNA聚合酶、Mg2+的浓度要分别达到0.1mmol/L,0.1μmol/L,0.01U/μL,1.48mmol/L效果较好。RT-PCR法对BNYVV检测,可作为甜菜品种(育种材料)早期抗丛根病性鉴定的依据之一。

References

[1]  Tamada T. Beet necrotic yellow vein virus[C] ∥CMI/AABDscrip Plant Virus, Wellesbourne UK:Association of AppliedBiologist, 1975:144.
[2]  Shirako Y, Brakke M K. Two purified RNAs of soil-bornewheat mosaic viruses are needed for infection[J]. J Gen Vi-rol, 1984, 65:119-127.
[3]  高锦梁, 邓 峰, 翟蕙琴, 等. 在我国发生的甜菜坏死黄脉病毒病[J]. 植物病理学报, 1983, 13(2):1-4.
[4]  白 晨, 云和义, 王友平, 等. 我国甜菜生产概况[J]. 内蒙古农业科技, 1997(5):8-10, 26.
[5]  白 晨, 云和义. 内蒙古甜菜生产概况[J]. 内蒙古农业科技, 1997(3):13-15.
[6]  曲文章, 崔广臣, 陈连江. 中国甜菜学[M]. 哈尔滨:黑龙江人民出版社, 2003:351-352.
[7]  牛素清, 白 晨, 张惠忠, 等. 甜菜抗(耐)丛根病品种引种试验[J]. 内蒙古农业科技, 2001(6):19-21.
[8]  董 立, 白  晨, 宫前恒, 等. 甜菜耐丛根病杂交组合C9203的选育[J]. 内蒙古农业科技, 1997(1):5-8.
[9]  金冬燕, 黎孟枫. 分子克隆指南[M]. 北京:科学出版社, 2002.
[10]  姚华建, 于嘉林, 刘 仪. 甜菜坏死黄脉病毒分子生物学研究进展[J]. 中国病毒学, 1995, 10(1):8-14.
[11]  牛建新, 刘连科, 王小兵, 等. 库尔勒香梨黄病毒 RT-PCR检测技术研究[J]. 中国农业科学, 2003, 36(5):561-566.
[12]  斯钦巴特尔, 莫日根, 哈斯阿古拉, 等. BNYVVCP 基因的克隆及载体构建[J]. 华北农学报, 2004, 19(2):37-39.
[13]  张惠忠, 白 晨, 云和义, 等. 甜菜抗(耐)丛根病育种进展[J]. 内蒙古农业科技, 1999(3):17-18.
[14]  Bouzoubaa S, Quillet L, Gulley H, et al. Nucleotide sequenceof beet necrotic yellow veins RNA-1[J]. Joural of GeneralVirology, 1987, 68:615-626.
[15]  Bouzoubaa S, Gulley H, JonardG, et al. Nucleotide sequenceanalysis of RNA3 and RNA4 of beet necrotic yellow veinvirus, isolates F2and G1[J]. Joural of General Virology,1985, 66:1 553-1 564.
[16]  Koenig R, L U ddecke P, Haeberle A M. Detection of beetnecrotic yellow vein virus stains, variants andmixed infectionby examining single-strand conformation polymorphisms ofimmunocapture RT-PCR products[J]. Joural of General Vi-rology, 1995, 76:2051-2055.
[17]  李大伟, 于嘉林, 韩成贵, 等. 中国甜菜坏死黄脉病毒RNA5的检测及其核苷酸序列分析[J]. 生物工程学报, 1999, 15(4):461-465.
[18]  侯义龙. 果树主要病毒 RT-PCR检测体系建立、优化及特异 DNA 片段克隆测序研究[D]. 沈阳:沈阳农业大学, 2000:11-13.

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