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ISSN: 2333-9721
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马铃薯纺锤块茎类病毒RT-PCR检测及全序列分析

DOI: 10.3321/j.issn:1000-7091.2003.z1.016, PP. 63-65

Keywords: 马铃薯纺锤块茎类病毒,反转录-聚合酶链式反应,检测,克隆,序列分析

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Abstract:

根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,经RTPCR法扩增出全长的cDNA片段,结果从感病组织中扩增出与预期的360bp大小的目标片段,而健康组织无此扩增产物;将其克隆到质粒pGEMT载体上,进行全序列分析。结果表明,与国内外的报道相比较,核苷酸同源率高达98%以上。PCR产物克隆作为RTPCR反应的阳性对照,解决了毒源保存和传播的问题,为进一步进行抗PSTVd基因工程研究打下了良好基础。

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