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ISSN: 2333-9721
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狂犬病病毒糖蛋白胞外区基因的原核表达、纯化及鉴定

DOI: 10.7668/hbnxb.2010.03.007, PP. 28-31

Keywords: 狂犬病病毒,糖蛋白,胞外区,纯化

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Abstract:

利用RT-PCR技术,将狂犬病病毒株ERA株糖蛋白胞外区基因分两段进行扩增,经克隆与序列分析,两片段大小分别为523,381bp,各编码174,127个氨基酸,分子量分别为19.7,14.5kDa。在原核表达载体pET-43a中分别克隆了这两段糖蛋白基因,将重组质粒转化到表达菌BL21(DE3)中,经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为94,89kDa处分别出现新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。两重组蛋白主要以可溶形式表达,利用Ni2+亲和层析柱纯化了蛋白,纯度大于95%。Western-Blot分析结果显示,两种重组融合蛋白均可与兔抗RBV多抗血清反应,具有良好的反应原性。

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