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ISSN: 2333-9721
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三种DNA提取方法对检测草莓镶脉病毒稳定性的研究

DOI: 10.7668/hbnxb.2015.03.034, PP. 200-204

Keywords: 植物DNA提取,CTAB试剂盒,高盐低pH法,SDS法

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Abstract:

草莓成熟叶片中含有大量的多糖、蛋白质、多酚和色素等物质,影响高质量DNA的提取和下游PCR反应的进行。为确定适用于PCR技术检测草莓镶脉病毒(Strawberryveinbandingvirus,SVBV)的DNA提取方法,从草莓叶片中提取DNA后,对样品中的SVBV进行特异性的PCR检测,比较确定不同DNA提取方法对PCR检测SVBV稳定性的影响。以感染SVBV的草莓叶片为材料,分别采用CTAB试剂盒法、高盐低pH法、改良SDS法提取草莓叶片的总DNA,将不同方法提取的DNA通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法进行测定,对DNA产量和质量进行分析。结果表明,3种方法均能获得较为完整的DNA片段,用CTAB试剂盒提取的DNA质量最高,改良SDS法提取的DNA质量较低。将不同方法提取的DNA经过PCR反应特异性检测SVBV后,将与目的片段大小一致的PCR扩增产物经序列测定及分析,证明与SVBV的序列相吻合,证明了方法的可靠性,其质量能够满足PCR特异性检测需要。

References

[1]  Guillemaut P,Drouard L M.Isolation of plant DNA:A fast,inexpensive and reliable method[J].Plant Molecular Biology Reporter,1992,10(1):60-65.
[2]  周厚成,何水涛.草莓病毒病研究进展[J].果树学报,2003(5):421-426.
[3]  高山林.草莓分生组织培养脱毒技术及应用[J].山西果树,2000(3):6.
[4]  Franova J.Occurrence of graft-transmissible virus diseases of the strawberry in the Czech republic[J].Acta Virologica,2001,45(3):151-157.
[5]  Tzanetakis I E,Martin R R.Expanding field of strawberry viruses which are important in North America[J].International Journal of Fruit Science,2013,13(1):184-195.
[6]  Andrew M Q,Michael J A,Eric B C,et al.Virus taxonomy:ninth report of the international committee on taxonomy of viruses[M].Amsterdam:Elsevier Academic Press,2012.
[7]  Maas J L.Compendium of strawberry diseases[M].Minnesota:The American Phytopathological Society Press,1998:62-71.
[8]  Mahmoudpour Ali.Infectivity of recombinant strawberry vein banding virus DNA[J].Journal of General Virology,2003,84(3):1377-1381.
[9]  刘 杰,高连明.红豆杉属植物三种不同总DNA提取方法的分析比较[J].广西植物,2011(2):244-249,159.
[10]  詹亚光,曾凡锁.富含多糖的白桦成熟叶片DNA的提取方法[J].东北林业大学学报,2005(3):24-25.
[11]  历 萍,肖雯霏,裘劼人,等.一种高效的草莓总核酸提取方法[J].浙江农业科学,2013(6):732-733.
[12]  肖 敏,张志宏,代红艳,等.PCR检测草莓镶脉病毒的稳定性研究[J].果树学报,2005,22(5):483-487.
[13]  隋 春,吴禄平,张志宏.利用PCR技术检测草莓镶脉病毒[J].园艺学报,2003,30(1):82-84.
[14]  Rowhani A,Biardi L,Routh G,et al.Development of a detection system for viruses of woody plants based on PCR analysis of immobilized virions[J].Phytopathology,1995,85(3):347-352.
[15]  D Hanzliková Va?ková*,J Pak,K Petrzik.Variability in sequence of Strawberry vein banding virus[J].Biologia Plantarum,2006(4):660-666.
[16]  郝朝运,刘 鹏,郭卫东,等.忍冬科部分植物DNA提取方法的研究[J].浙江师范大学学报:自然科学版,2006(1):92-98.
[17]  王景雪,孙 毅,高武军.一种简便实用的植物总DNA提取方法[J].山西大学学报:自然科学版,2000(3):271-272.
[18]  姚 丹,闫 伟,关淑艳,等.高盐低pH值法提取大豆不同组织DNA的效果[J].河南农业科学,2009(12):50-54.
[19]  Thompson J R,Wetzel S,Klerks M M,et al.Multiplex RT-PCR detection of four aphid-borne strawberry viruses in Fragaria spp.in combination with a plant mRNA specific internal control[J].Journal of Virologial Methods,2003,111:85-93.
[20]  王传堂,黄 粤,杨新道,等.改良CTAB法和高盐低pH值法提取花生DNA的效果[J].花生学报,2002,31(3):20-23.

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