小鼠ZP2肽的基因克隆和原核表达载体的构建

目的克隆小鼠卵透明带2(mZP2)肽的基因并构建原核表达载体。方法从小鼠卵巢组织中分离出mRNA,并以此作为模板,通过RT-PCR扩增出小鼠ZP2肽的cDNA片段,将其克隆到pET原核表达载体。将该重组mZP2基因转化Rosetta-gami(DE3)pLysS菌,通过SDS-PAGE和Westernblotting分析重组蛋白的表达情况。结果克隆小鼠ZP2肽的cDNA片段,构建原核表达载体pET-mZP2,经SDS-PAGE和Westernblotting鉴定表明表达产物是约36ku具有6个组氨酸标签肽的融合蛋白。结论成功克隆小鼠ZP2基因片段,构建的mZP2原核表达载体具有表达功能。