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ISSN: 2333-9721
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大分子拥挤条件下光诱导细胞色素C还原的光谱研究
DOI: 10.6023/A13101029, PP. 246-252
Keywords: 大分子拥挤环境,光照还原,细胞色素C,光谱法,蛋白二级结构
Abstract:
稀溶液中高铁细胞色素C(ferriccytochromec,Fe(Ⅲ)-Cytc)能被光照还原成亚铁细胞色素C(ferrouscytochromec,Fe(Ⅱ)-Cytc),但这一研究忽略了生物体细胞的真实环境是高度拥挤的,因此采用紫外可见、同步荧光及圆二色谱光谱法研究了大分子拥挤环境中光诱导Cytc的还原过程及其对外界环境的依赖情况.UV-Vis光谱和同步荧光光谱结果表明,拥挤试剂葡聚糖70(Dextran70)和聚蔗糖70(Ficoll70)的加入利于Cytc光还原的进行,且Ficoll70存在时Cytc光还原程度远高于Dextran70存在时;Dextran70和Ficoll70环境中光诱导Cytc还原的最适温度分别为37℃和25℃,定波长280nm光照射利于Cytc还原;Cytc的光还原程度随着Dextran70浓度增加而增大,Ficoll70环境中Cytc的最适光还原浓度为100g·L-1;拥挤环境下Met,Trp,Tyr和Phe的存在对光诱导Cytc的还原过程依Phe>Tyr>Trp>Met顺序有催化促进作用;CD光谱结果表明光照射稀溶液中Cytc蛋白还原后,其α-螺旋含量降低,β-折叠含量升高,而光照射拥挤环境中Cytc还原后蛋白的二级结构基本没变化.结果表明拥挤试剂具有稳定蛋白质二级结构的作用,且影响光还原Cytc的电子传递过程及效率.
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