全部 标题 作者
关键词 摘要

OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用:99美元

查看量下载量

相关文章

更多...

人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备

, PP. 1579-1581

Keywords: YB-,原核表达,亲和层析,多抗制备

Full-Text   Cite this paper   Add to My Lib

Abstract:

目的构建YB-1原核表达系统,诱导表达后纯化YB?1融合蛋白并制备其多抗。方法采用RT-PCR扩增YB-1编码序列,将该序列克隆至载体pET-32a(+);转化BL21(DE3),确定最佳表达条件;采用亲和层析与超滤纯化目的蛋白,经Westernblot鉴定后免疫家兔,制备其抗体。结果成功扩增YB-1编码序列并构建了其表达载体;SDS-PAGE结果显示,表达条件经优化后(28℃,5h,0.5mmol/LIPTG),YB-1融合蛋白在BL21中得到高效可溶性表达;Westernblot结果证实,表达产物经纯化后获得了纯度较高的YB-1融合蛋白,将该蛋白免疫家兔后获得了效价与特异性较高的抗体。结论成功建立了YB-1蛋白的原核表达系统及蛋白纯化方法,并制备了其抗体。

References

[1]  李朴,孔飞飞,余雪梅,等. 人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备[J].第三军医大学学报,2010,32(14):1579-1581.
[2]  吴燕,伍素华,罗向东,等.重组溶葡萄球菌蛋白的原核表达、纯化及生物学活性研究[J].第三军医大学学报,2007,29(11):1060.  WU Yan,WU Su-hua,LUO Xiang-dong,et al.Prokaryotic expression, purification of recombinant lysostaphic protein and an initial study on its biological activities[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(14):1060. [2]陈宗涛,刘丽梅,徐小峰,等.Myosin-Vc特异性片段的原核表达及其抗血清的制备[J].第三军医大学学报,2008,30(07):600.  CHEN Zong-tao,LIU Li-mei,XU Xiao-feng,et al.Prokaryotic expression, purification and polyclonal antibody preparation of human myosin-Vc[J].J Third Mil Med Univ,2008,30(14):600. [3]朱继.大鼠神经球蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J].第三军医大学学报,2008,30(04):326.  ZHU Ji.Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of rat neuroglobin gene[J].J Third Mil Med Univ,2008,30(14):326. [4]王英,徐文岳,陈继德,等.大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶的交叉免疫活性[J].第三军医大学学报,2008,30(01):11.  WANG Ying,XU Wen-yue,CHEN Ji-de,et al.Cross-immunoreactivity between serine proteases from Anopheles dirus and Manduca[J].J Third Mil Med Univ,2008,30(14):11. [5]谭江琳,袁顺宗,彭旭,等.人重组蛋白P311的原核表达纯化与鉴定[J].第三军医大学学报,2008,30(01):19.  TAN Jiang-lin,YUAN Shun-zong,PENG Xu,et al.Prokaryotic expression, purification and identification of human P311 protein[J].J Third Mil Med Univ,2008,30(14):19. [6]丛延广,刘利,陈志瑾,等.结核分枝杆菌PstS1-U1融合抗原的表达、纯化及其免疫活性测定[J].第三军医大学学报,2007,29(15):1473.  CONG Yan-guang,LIU Li,CHEN Zhi-jin,et al.Prokaryotic expression, purification and immunological activity determination of PstS1-U1 fused antigen of Mycobacterium tuberculosis[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(14):1473. [7]刘宝英,郑英如,何凤田,等.人可溶性TALL-2突变体的原核表达及纯化[J].第三军医大学学报,2006,28(23):2346. [8]彭旭,袁顺宗,王晓娟,等.人HT036蛋白的原核表达及鉴定[J].第三军医大学学报,2007,29(09):817.  PENG Xu,YUAN Shun-zong,WANG Xiao-juan,et al.Prokaryotic expression and identification of human HT036 protein[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(14):817. [9]连继勤,戴旭芳,李晓辉,等.hLNα4LG1基因克隆、表达及生物学活性检测[J].第三军医大学学报,2006,28(14):1464. [10]龚薇,何凤田,高会广,等.重组小鼠高迁移率族蛋白B1抗菌活性研究[J].第三军医大学学报,2006,28(09):939.

Full-Text

Contact Us

service@oalib.com

QQ:3279437679

WhatsApp +8615387084133