%0 Journal Article
%T 人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备
%A 李朴
%A 孔飞飞
%A 余雪梅
%A 成凤
%A 涂植光
%J 第三军医大学学报
%P 1579-1581
%D 2010
%X 目的构建YB-1原核表达系统，诱导表达后纯化YB？1融合蛋白并制备其多抗。方法采用RT-PCR扩增YB-1编码序列，将该序列克隆至载体pET-32a(+)；转化BL21(DE3)，确定最佳表达条件；采用亲和层析与超滤纯化目的蛋白，经Westernblot鉴定后免疫家兔，制备其抗体。结果成功扩增YB-1编码序列并构建了其表达载体；SDS-PAGE结果显示，表达条件经优化后（28℃,5h,0.5mmol/LIPTG），YB-1融合蛋白在BL21中得到高效可溶性表达；Westernblot结果证实，表达产物经纯化后获得了纯度较高的YB-1融合蛋白，将该蛋白免疫家兔后获得了效价与特异性较高的抗体。结论成功建立了YB-1蛋白的原核表达系统及蛋白纯化方法，并制备了其抗体。
%K YB-
%K 原核表达
%K 亲和层析
%K 多抗制备
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200912115