人源靶向补体抑制物CR2-CD59在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达

目的构建人源靶向补体抑制物CR2-CD59，并筛选中国仓鼠卵巢细胞（Chinesehamsterovarycell，CHO）高效表达细胞株。方法运用FuGENE6转染试剂，将含有人CR2-CD59的重组PEE14.1质粒转入CHO细胞，蛋氨酸亚氨基代砜（MSX）筛选出阳性克隆，并利用无血清培养基对CHO细胞表达株进行培养获得重组蛋白，以ELISA、SDS-PAGE和Westernblot对表达蛋白进行鉴定。结果成功构建PEE14.1-CR2-CD59重组质粒，获得CHO细胞稳定表达株。SDS-PAGE结果表明，重组蛋白CR2-CD59的相对分子质量同预期结果一致。ELISA和Westernblot鉴定重组蛋白CR2-CD59可与CR2、CD59多克隆抗体特异性结合。且与含血清培养基相比，无血清培养基能明显提高CHO细胞的蛋白表达量（P<0.05）。结论在CHO细胞中成功表达人源靶向补体抑制物CR2-CD59。