%0 Journal Article %T 人源靶向补体抑制物CR2-CD59在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达 %A 郭彦 %A 寇志华 %A 孙世惠 %A 张传福 %A 赵光宇 %A 于虹 %A 宋宏彬 %A 乔飞 %A 陈万荣 %A 周育森 %J 第三军医大学学报 %P 887-890 %D 2010 %X 目的构建人源靶向补体抑制物CR2-CD59,并筛选中国仓鼠卵巢细胞(Chinesehamsterovarycell,CHO)高效表达细胞株。方法运用FuGENE6转染试剂,将含有人CR2-CD59的重组PEE14.1质粒转入CHO细胞,蛋氨酸亚氨基代砜(MSX)筛选出阳性克隆,并利用无血清培养基对CHO细胞表达株进行培养获得重组蛋白,以ELISA、SDS-PAGE和Westernblot对表达蛋白进行鉴定。结果成功构建PEE14.1-CR2-CD59重组质粒,获得CHO细胞稳定表达株。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白CR2-CD59的相对分子质量同预期结果一致。ELISA和Westernblot鉴定重组蛋白CR2-CD59可与CR2、CD59多克隆抗体特异性结合。且与含血清培养基相比,无血清培养基能明显提高CHO细胞的蛋白表达量(P<0.05)。结论在CHO细胞中成功表达人源靶向补体抑制物CR2-CD59。 %K 中国仓鼠卵巢细胞 %K CR-CD %K 补体 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200912269