博尔纳病毒P24转染后不同时期核酸和蛋白的表达及细胞定位

目的通过观察博尔纳病毒（bornadiseasevirus，BDV）磷蛋白（P24）及其编码核酸不同时期的表达和细胞定位，探索BDV潜伏感染的机制。方法构建包含BDVGFP-P24质粒的OL细胞模型，检测并比较不同时期P24核酸和蛋白的表达；对构建的OL细胞模型和各种阴性对照进行逆转录原位PCR的检测，观察P24蛋白编码核酸的细胞定位；使用倒置荧光显微镜观察OL细胞中P24蛋白的细胞定位。结果成功构建了含BDVGFP-P24质粒的OL细胞，发现转染后20代以内细胞P24核酸和蛋白的表达差异不显著(P>0.05)；BDV的P24重组蛋白基因始终定位于细胞核，其蛋白早期在细胞核出现，反复传代约15次后可同时在细胞核和细胞质内出现。结论BDV的重组蛋白P24在病毒感染过程中起关键作用，其编码基因始终存在于宿主细胞核内，但表达的蛋白可以在一定时期通过核膜进入细胞质。？