%0 Journal Article %T 博尔纳病毒P24转染后不同时期核酸和蛋白的表达及细胞定位 %A 徐鸣明 %A 张英英 %A 展群岭 %A 何丰 %A 张亮 %A 金戈 %A 宋哲 %A 李亚军 %A 李雷雷 %A 谢鹏 %J 第三军医大学学报 %P 533-536 %D 2010 %X 目的通过观察博尔纳病毒(bornadiseasevirus,BDV)磷蛋白(P24)及其编码核酸不同时期的表达和细胞定位,探索BDV潜伏感染的机制。方法构建包含BDVGFP-P24质粒的OL细胞模型,检测并比较不同时期P24核酸和蛋白的表达;对构建的OL细胞模型和各种阴性对照进行逆转录原位PCR的检测,观察P24蛋白编码核酸的细胞定位;使用倒置荧光显微镜观察OL细胞中P24蛋白的细胞定位。结果成功构建了含BDVGFP-P24质粒的OL细胞,发现转染后20代以内细胞P24核酸和蛋白的表达差异不显著(P>0.05);BDV的P24重组蛋白基因始终定位于细胞核,其蛋白早期在细胞核出现,反复传代约15次后可同时在细胞核和细胞质内出现。结论BDV的重组蛋白P24在病毒感染过程中起关键作用,其编码基因始终存在于宿主细胞核内,但表达的蛋白可以在一定时期通过核膜进入细胞质。? %K 博尔纳病 %K 逆转录原位PCR %K 磷蛋白 %K 感染 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200909015