全部 标题 作者
关键词 摘要

OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用:99美元

查看量下载量

相关文章

更多...

PRP基因RNAi重组慢病毒制备及PRP基因与睾丸间质细胞增殖和睾酮产生的关系

, PP. 1099-1102

Keywords: proliferin相关蛋白,慢病毒,睾酮,间质细胞

Full-Text   Cite this paper   Add to My Lib

Abstract:

目的制备PRPRNAi重组慢病毒,并对PRP基因功能进行初步研究。方法采用miRNA方式抑制PRP基因表达,筛选最有效序列包装慢病毒,用于转染TM3睾丸间质细胞。转染实验分为TM3-negative对照组(阴性对照质粒组,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-negcontrol质粒)以及A、B、C3个干扰质粒组(分别转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B,C质粒);RT-PCR与Westernblot方法检测慢病毒对PRP基因表达影响,MTT方法检测细胞增殖情况,ELISA方法检测细胞睾酮产生情况。结果经测序鉴定,成功制备了PRPRNAi重组慢病毒;与阴性对照质粒组比较,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B组可有效下调TM3细胞PRPmRNA和蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。MTT结果表明抑制PRP基因后,TM3细胞的增殖加快(P<0.01)。此外,相较于对照组,下调PRP基因抑制促黄体生成素(luteinizinghormone,LH)刺激产生睾酮的效应(P<0.05)。结论成功制备了PRPRNAi重组慢病毒,对其功能初步研究显示,PRP不仅与睾丸间质细胞增殖有关,而且参与睾酮产生。

References

[1]  赵丽娜, 郝杰, 胡建刚, 等. PRP基因RNAi重组慢病毒制备及PRP基因与睾丸间质细胞增殖和睾酮产生的关系[J].第三军医大学学报,2011,33(11):1099-1102.
[2]  陈柯宏,何江,王德林,等.慢病毒介导LATS1过表达对人肾癌细胞系786-0增殖、凋亡及下游癌基因YAP的影响[J].第三军医大学学报,2015,37(17):1727.  Chen Kehong,He Jiang,Wang Delin,et al.Lentivirus-mediated LATS1 overexpression suppresses proliferation, improves apoptosis and down-regulates downstream oncogene YAP in human renal cell carcinoma 786-0 cells[J].J Third Mil Med Univ,2015,37(11):1727. [2]刘云杰,袁月,童珂雅,等.以支架为载体的TRADD基因慢病毒转染对食管良性狭窄的抑制作用[J].第三军医大学学报,2015,37(18):1806.  Liu Yunjie,Yuan Yue,Tong Keya,et al.Inhibitory effect of TRADD gene-expressing lentivirus vector transfection with covered stent as carrier in canine benign esophageal stricture[J].J Third Mil Med Univ,2015,37(11):1806. [3]郭建新,李力,白?,等.慢病毒携带shRNA对宫颈癌细胞中HPV16型E6表达的抑制作用[J].第三军医大学学报,2006,28(11):1218. [4]庞浩,刘昌峨,刘勤,等.慢病毒介导的CYP3A11基因knock-down小鼠的建立[J].第三军医大学学报,2010,32(05):422.  Pang Hao,Liu Change,Liu Qin,et al.Establishment of CYP3A11 gene knock-down mouse by lentiviral transgenesis[J].J Third Mil Med Univ,2010,32(11):422. [5]王雪飞,张纲,裘松波,等.构建siRNA慢病毒载体调控人牙髓干细胞Delta1表达的实验研究[J].第三军医大学学报,2010,32(01):30.  Wang Xuefei,Zhang Gang,Qiu Songbo,et al.Regulation of Delta1 expression in DPSCs by specific siRNA lentivirus vector[J].J Third Mil Med Univ,2010,32(11):30. [6]张志波,蔡磊,郑树国,等.Caveolin-1 RNA干扰慢病毒载体的构建及其对肝癌细胞株SMMC7721侵袭的影响[J].第三军医大学学报,2009,31(10):931.  ZHANG Zhi-bo,CAI Lei,ZHENG Shu-guo,et al.Construction of recombinant lentivirol expression vector carrying human Caveolin-1 with RNA interference and its effect on invasiveness of SMMC7721 cells[J].J Third Mil Med Univ,2009,31(11):931. [7]王延洲,梁志清,刘晓芳,等.Smad3基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J].第三军医大学学报,2009,31(08):701.  WANG Yan-zhou,LIANG Zhi-qing,LIU Xiao-fang,et al.Construction and identification of lentiviral vector encoding shRNA against Smad3[J].J Third Mil Med Univ,2009,31(11):701. [8]陈加荣,杨柳,戴刚,等.SPIO、GFP双重标记猪骨髓间充质干细胞的研究[J].第三军医大学学报,2011,33(21):2313. [9]张立群,段文元,许雪青,等.B7-H1慢病毒的制备及其在B16F10细胞中的表达鉴定[J].第三军医大学学报,2007,29(01):24.  ZHANG Li-qun,DUAN Wen-yuan,XU Xue-qing,et al.Construction of recombinant lentivirol expression vector carrying mouse B7-H1 gene and its expression and identification in B16F10 cells[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(11):24. [10]李睿夫,彭代智,钱卫,等.慢病毒转染人角质形成细胞高表达核纤层蛋白B1[J].第三军医大学学报,2013,35(09):837.  Li Ruifu,Peng Daizhi,Qian Wei,et al.Over-expression of lamin B1 in human immortal keratinocyte through lentiviral vector[J].J Third Mil Med Univ,2013,35(11):837.

Full-Text

Contact Us

service@oalib.com

QQ:3279437679

WhatsApp +8615387084133