%0 Journal Article %T PRP基因RNAi重组慢病毒制备及PRP基因与睾丸间质细胞增殖和睾酮产生的关系 %A 赵丽娜 %A 郝杰 %A 胡建刚 %A 吕自兰 %A 王琦 %A 王丽敏 %A 余秋波 %A 王应雄 %A 黎刚 %J 第三军医大学学报 %P 1099-1102 %D 2011 %X 目的制备PRPRNAi重组慢病毒,并对PRP基因功能进行初步研究。方法采用miRNA方式抑制PRP基因表达,筛选最有效序列包装慢病毒,用于转染TM3睾丸间质细胞。转染实验分为TM3-negative对照组(阴性对照质粒组,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-negcontrol质粒)以及A、B、C3个干扰质粒组(分别转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B,C质粒);RT-PCR与Westernblot方法检测慢病毒对PRP基因表达影响,MTT方法检测细胞增殖情况,ELISA方法检测细胞睾酮产生情况。结果经测序鉴定,成功制备了PRPRNAi重组慢病毒;与阴性对照质粒组比较,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B组可有效下调TM3细胞PRPmRNA和蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。MTT结果表明抑制PRP基因后,TM3细胞的增殖加快(P<0.01)。此外,相较于对照组,下调PRP基因抑制促黄体生成素(luteinizinghormone,LH)刺激产生睾酮的效应(P<0.05)。结论成功制备了PRPRNAi重组慢病毒,对其功能初步研究显示,PRP不仅与睾丸间质细胞增殖有关,而且参与睾酮产生。 %K proliferin相关蛋白 %K 慢病毒 %K 睾酮 %K 间质细胞 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201011041