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ISSN: 2333-9721
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核糖核酸酶抑制因子与血管生成素的相互作用

, PP. 1454-1459

Keywords: 核糖核酸酶抑制因子,血管生成素,相互作用

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Abstract:

目的探讨核糖核酸酶抑制因子(ribonucleaseinhibitor,RI)与血管生成素(angiogenin,ANG)的相互作用。方法利用免疫荧光标记结合共聚焦显微镜技术来确立RI与ANG蛋白在细胞内的共定位。利用激光共聚焦显微镜的荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytransfer,FRET)技术验证RI和ANG蛋白的相互作用。构建原核表达质粒pGEX-4T-RI,转化E.coliBL21大肠杆菌(DE3)表达,并经谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B(glutathionesepharose4B)纯化GST-RI蛋白,考马斯亮蓝染色和免疫印迹鉴定表达情况,利用GST蛋白沉降技术检测RI与ANG蛋白在体外的结合作用。应用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)实验检测两蛋白在真核细胞内的结合作用。结果细胞内免疫荧光标记的RI和ANG蛋白在激光共聚焦显微镜观察下存在共定位现象。FRET结果显示RI与ANG在细胞内存在相互作用。另外酶切和测序结果证明原核表达质粒pGEX-4T-RI构建成功,GST-RI蛋白诱导表达正确,GST蛋白沉降结果显示RI和ANG蛋白在原核细胞反应体系中存在相互作用。结论RI和ANG蛋白在原核细胞反应体系和真核细胞中均存在相互结合作用。?

References

[1]  李林, 舒静, 刘玉林, 等. 核糖核酸酶抑制因子与血管生成素的相互作用[J].第三军医大学学报,2014,36(14):1454-1459.
[2]  陈俊霞,高娟,朱军,等.沉默核糖核酸酶抑制因子促进膀胱癌BIU-87细胞生长和转移潜能[J].第三军医大学学报,2011,33(22):2357.  Chen Junxia,Gao Juan,Zhu Jun,et al.Silencing human ribonuclease inhibitor promotes growth and metastasis potentials in bladder cancer BIU-87 cells[J].J Third Mil Med Univ,2011,33(14):2357. [2]潘湘阳,李红彦,姚雪,等.核糖核酸酶抑制因子过表达抑制B16细胞的侵袭和转移[J].第三军医大学学报,2012,34(04):284.  Pan Xiangyang,Li Hongyan,Yao Xue,et al.Over-expression of human ribonuclease inhibitor suppresses invasion and migration in B16 melanoma cells[J].J Third Mil Med Univ,2012,34(14):284. [3]舒静,田文琳,李林,等.下调血管生成素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响[J].第三军医大学学报,2014,36(14):1460.  Shu Jing,Tian Wenlin,Li Lin,et al.Effect of down-regulating human angiogenin on proliferation and apoptosis in human bladder cancer T24 cells[J].J Third Mil Med Univ,2014,36(14):1460. [4]李红彦,潘湘阳,姚雪,等.RI基因真核表达载体的构建及其对人脐静脉内皮细胞的影响[J].第三军医大学学报,2012,34(16):1591.  Li Hongyan,Pan Xiangyang,Yao Xue,et al.Construction of eukaryotic expression vector pcDNA3.1-RI and its effect on human umbilical vein endothelial cells[J].J Third Mil Med Univ,2012,34(14):1591.

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