大鼠RGS4基因的克隆及在原核中的表达

目的构建pGEX4T-1-RGS4载体，并检测融合蛋白GST-RSG4在原核中的表达水平。方法采用RT-PCR方法，将克隆SD大鼠G蛋白信号转导调节因子（regulatorofGproteinsignaling4，RGS4）基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pGEX4T-1中，IPTG诱导原核表达，通过Westernblot检测融合蛋白GST-RSG4的表达水平。结果成功构建了pGEX4T-1-RGS4载体；经IPTG的诱导，RGS4可与GST以融合蛋白的形式高效表达。pGEX4T-1-RGS4在原核内表达产物相对分子质量约为50×103，与预期融合蛋白大小一致。结论构建的重组质粒能够在大肠杆菌中高效表达。