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ISSN: 2333-9721
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三维立体培养SD大鼠骨髓间充质干细胞的研究

, PP. 1140-1143

Keywords: 骨髓间充质干细胞,Ⅰ型胶原,基质胶,细胞外基质胶

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Abstract:

目的建立三维立体培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)的方法。方法分离SD大鼠胫骨、股骨,冲洗骨髓腔,通过密度梯度离心并结合贴壁法培养BMSCs,流式细胞仪检测其生长周期,电子显微镜观察其内部结构,免疫细胞化学法进行细胞表面抗原标志物鉴定。后将其接种到细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)胶中,加入DMEM-F12细胞培养液进行三维立体培养。结果培养的细胞呈梭形,成纤维细胞样,单核,增殖能力强。流式细胞术显示93.10%细胞处于G0~G1期。透射电镜结果显示细胞核质比例较大,核仁大而明显,细胞表面有较多微绒毛,细胞质细胞器丰富,表现出未分化细胞的特征。免疫组织化学结果显示细胞表达波形蛋白(vimentin)、纤维连接蛋白(fibronectin),不表达角蛋白(keratin)。BMSCs在ECM胶中生长良好。结论分离、培养的细胞为骨髓BMSCs,在三维培养体系中生长良好。

References

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