%0 Journal Article %T 三维立体培养SD大鼠骨髓间充质干细胞的研究 %A 李芙蓉 %A 张莹 %A 王代红 %A 程悦 %A 张耀全 %A 王沂芹 %A 侯卫平 %A 卫静 %A 袁发焕 %J 第三军医大学学报 %P 1140-1143 %D 2009 %X 目的建立三维立体培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)的方法。方法分离SD大鼠胫骨、股骨,冲洗骨髓腔,通过密度梯度离心并结合贴壁法培养BMSCs,流式细胞仪检测其生长周期,电子显微镜观察其内部结构,免疫细胞化学法进行细胞表面抗原标志物鉴定。后将其接种到细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)胶中,加入DMEM-F12细胞培养液进行三维立体培养。结果培养的细胞呈梭形,成纤维细胞样,单核,增殖能力强。流式细胞术显示93.10%细胞处于G0~G1期。透射电镜结果显示细胞核质比例较大,核仁大而明显,细胞表面有较多微绒毛,细胞质细胞器丰富,表现出未分化细胞的特征。免疫组织化学结果显示细胞表达波形蛋白(vimentin)、纤维连接蛋白(fibronectin),不表达角蛋白(keratin)。BMSCs在ECM胶中生长良好。结论分离、培养的细胞为骨髓BMSCs,在三维培养体系中生长良好。 %K 骨髓间充质干细胞 %K Ⅰ型胶原 %K 基质胶 %K 细胞外基质胶 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200902154