MAPK信号通路对人胆管癌细胞Fas配体基因表达的调节及其机制的初步探讨

目的观察MAPK/ERKkinase(MEK)抑制剂PD98059对人胆管癌细胞Fas配体（Fasligand,FasL）表达的影响及其作用机制。方法用RT-PCR和Westernbolt检测PD98059处理组及未处理组人胆管癌细胞（QBC939）中c-Myc、p-c-Myc和FasL的表达；构建含FasL基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,瞬时转染人胆管癌细胞，用PD98059处理后，检测荧光素酶相对活性，比较启动子活性的变化情况；染色质免疫共沉淀（ChIP）技术分析p-c-Myc和FasL基因启动子的结合情况。结果PD98059处理组胆管癌细胞磷酸化c-Myc（p-c-Myc）和FasL的表达均明显降低，而c-Myc未见明显变化；人胆管癌活细胞中p-c-Myc与FasL基因启动子有结合；PD98059处理组胆管癌细胞荧光素酶活性与对照组相比下降约80%。结论PD98059通过抑制MAPK/ERKkinase(MEK)的活性，降低c-Myc磷酸化水平，进而下调FasL基因启动子活性，从而抑制人胆管癌细胞FasL基因的表达。