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ISSN: 2333-9721
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Core2和Core4O-型糖链参与大肠杆菌对肠上皮细胞的黏附与侵袭

, PP. 105-109

Keywords: 黏蛋白,大肠杆菌,O-型糖链,CGnT-,细胞黏附,侵袭

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Abstract:

目的探讨大肠杆菌对Core2和Core4O-型糖链合成障碍的肠上皮细胞的黏附和侵袭的影响。方法采用针对C2GnT-2的干扰质粒和对照质粒对结肠癌HT-29细胞进行转染，通过G418筛选建立稳定转染的细胞系，采用Real-timePCR和Westernblot方法检测干扰效率，选取干扰最有效的稳定细胞系与肠致病性大肠杆菌（enteropathogenic？Escherichiacoli，EPEC）和肠出血性大肠杆菌（EHECO157∶H7）37℃共培养。最后采用系列稀释克隆计数法观察干扰Core2和Core4O-型糖链合成的C2GnT-2的HT-29细胞对细菌黏附及侵袭的影响。结果成功筛选获得shRNA-C2GnT-2及shRNA-Ctr稳定转染的HT-29细胞。Real-timePCR和Westernblot检测证实干扰质粒能够有效地抑制HT-29细胞内C2GnT-2的mRNA及蛋白水平表达(P<0.01)，黏附于shRNA-C2GnT-2/HT-29细胞表面的EPEC或EHECO157∶H7的数量较对照细胞显著减少（P<0.01，P<0.05)，而侵袭入shRNA-C2GnT-2/HT-29细胞内的EPEC或EHECO157∶H7的数量较对照细胞显著增加（P<0.01，P<0.05)。结论Core2和Core4O-型糖链参与了肠上皮细胞细菌的黏附与侵袭。

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